Мониторинг производственной среды является основополагающим элементом обеспечения требований надлежащей производственной практики (GMP) при выпуске иммунобиологических препаратов. В статье представлены практические подходы к организации контроля на GMP-площадке, включая микробиологический мониторинг воздуха, поверхностей, оборудования и технологической одежды персонала, а также химико-микробиологический контроль воды очищенной и воды для инъекций. Рассмотрены методы, применяемые на производстве: седиментационный и аспирационный для воздуха, смывы с контактных поверхностей и оборудования, отпечатки перчаток и одежды персонала, мембранная фильтрация и тест на бактериальные эндотоксины для воды. Химический контроль включал измерение рН, удельной электрической проводимости, анализ нитратов, тяжёлых металлов и общего органического углерода с использованием современного оборудования Shimadzu TOC-L. Результаты показали полное соответствие нормативным требованиям GMP, отсутствие микробного роста и стабильность химических параметров. Комплексный мониторинг подтверждён как эффективный инструмент управления рисками, обеспечивающий биологическую безопасность, надёжность асептических процессов и стабильное качество продукции в соответствии с международными стандартами.

В настоящей работе представлены результаты оценки специфичности праймеров и зондов, разработанных для мультиплексной Real-time ПЦР тест-системы, предназначенной для диагностики гриппа птиц и болезни Ньюкасла. Для проверки специфичности использовали РНК вирусов болезни Ньюкасла, гриппа птиц А типа и инфекционного бронхита кур. В качестве положительных контролей применялись сконструированные плазмидные ДНК с фрагментами генов М (вирус болезни Ньюкасла) и NP (вирус гриппа птиц), отрицательным контролем служила деионизированная вода. Оптимизированная программа амплификации включала этап обратной транскрипции, денатурации и 45 циклов ПЦР в реальном времени с регистрацией флуоресцентных сигналов.

Полученные результаты показали, что разработанные праймеры и зонды обеспечивают избирательное определение целевых геномных фрагментов вирусов при отсутствии перекрёстных реакций и ложноположительных сигналов. Дополнительно проведено сравнение с коммерческими наборами ПЦР-ГРИПП-А-ФАКТОР и ПЦР-НЬЮКАСЛА-ФАКТОР, результаты которого подтвердили достоверность и воспроизводимость данных, полученных с использованием разработанной системы.

Таким образом, разработанная тест-система характеризуется высокой специфичностью и может быть рекомендована для применения в ветеринарной диагностике.

В настоящем исследовании проведена оценка переносимости компонентов вакцинной композиции в отсутствие антигенного компонента при их интраназальном и сублингвальном введении у белых беспородных лабораторных мышей. В качестве объектов исследования использовали вспомогательные компоненты вакцинной композиции — маннитол (3 %, 5 %, 7 %) и желатин (0,3 %, 0,5 %, 0,7 %), а также фосфатно-буферный раствор (ФБР, 0,01 М, pH 7,2–7,4), применяемый в качестве буферной среды, и инъекционную воду, используемую как технологический растворитель при приготовлении вакцинных кандидатов. Контрольную группу составляли интактные животные. Вещества вводили сублингвально (50 мкл) и интраназально (30 мкл).

В течение 10 суток оценивали местную (мукозальную) и системную переносимость исследуемых веществ по показателям привеса массы тела, клинического состояния животных, а также биохимическим показателям крови, включая активность аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ), уровень общего билирубина, глюкозы и общего белка. Все исследованные вещества продемонстрировали хорошую переносимость: привес массы тела соответствовал физиологической норме, местные реакции на уровне слизистых оболочек отсутствовали либо были минимальными, системные клинические проявления не регистрировались, а биохимические показатели крови оставались в пределах референтных значений. По совокупности оцениваемых параметров маннитол в концентрации 5 % и желатин в концентрации 0,5 % были определены как оптимальные.

Полученные данные свидетельствуют о безопасности исследованных компонентов и технологических сред и могут быть использованы на этапе разработки технологии вакцинной композиции векторных противобруцеллезных вакцин-кандидатов на основе вируса гриппа.

В работе представлены результаты комплексного исследования биологических свойств изолята высокопатогенного вируса гриппа птиц A/Cygnus cygnus/Karakol lake/01/2024 (H5N1), выделенного в Мангистауской области Республики Казахстан при вспышке в 2023–2024 гг. Проведена оценка его патогенности на 6-недельных СПФ-цыплятах, а также репродуктивной активности в развивающихся куриных эмбрионах. Показано, что вирус обладает высокой вирулентностью, вызывает 100% гибель заражённых эмбрионов в течение 48 часов и характеризуется максимальным значением интравенозного индекса патогенности (ИВИП = 3,6). Полученные данные подтверждают принадлежность изолята к высокопатогенным вариантам H5N1.

Глобальный рост антибиотикорезистентности, особенно среди патогенов группы ESKAPE (Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa и Enterobacter cloacae), обусловливает необходимость разработки альтернативных антимикробных средств, к которым относится фаготерапия, основанная на использовании бактериофагов, способных образовывать бактериальные клетки. Целью настоящего исследования являлся контроль качества экспериментальной серии препарата «Бактериофаг против патогенов ESKAPE», разработанного в ТОО «Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности» (Республика Казахстан). Объектом исследования послужили три экспериментальные серии препаратов (№0011224, №0021224, №0031224), для которых проведена оценка внешнего вида, извлекаемого объема, содержания водородных ионов (pH), гигиеничности и специфической активности в отношении тест-культур группы ESKAPE в соответствии с требованиями СК-ESKAPE-ПР-23, Государственной фармакопеи Республики Казахстан и нормативных документов Евразийского химического соединения. Установлено, что все соответствующие серии обозначены установленными требованиями, характеризовались стабильными физико-тическими показателями, подтвержденной стерильностью и высокой специфической химической активностью, сохраняющей при существующих разведениях до 10⁻⁷–10⁻¹⁰. Полученные результаты свидетельствуют о стабильности, специфичности и соответствии экспериментальных серий установленным требованиям, что обеспечивает устойчивость дальнейшего изучения и актуальность данных фагопрепаратов для профилактики и терапии, вызываемых антибиотикорезистентными патогенами группы ESKAPE.

В работе представлены результаты комплексного исследования биологических свойств изолята высокопатогенного вируса гриппа птиц A/Cygnus cygnus/Karakol lake/01/2024 (H5N1), выделенного в Мангистауской области Республики Казахстан при вспышке в 2023-2024 гг. Проведена оценка его патогенности на 6-недельных СПФ-цыплятах, а также репродуктивной активности в развивающихся куриных эмбрионах. Показано, что вирус обладает высокой вирулентностью, вызывает 100% гибель заражённых эмбрионов в течение 48 часов и характеризуется максимальным значением интравенозного индекса патогенности (ИВИП = 3,6). Полученные данные подтверждают принадлежность изолята к высокопатогенным вариантам H5N1.

В настоящей работе представлены результаты оценки специфичности праймеров и зондов, разработанных для мультиплексной Real-time ПЦР тест-системы, предназначенной для диагностики гриппа птиц и болезни Ньюкасла. Для проверки специфичности использовали РНК вирусов болезни Ньюкасла, гриппа птиц А типа и инфекционного бронхита кур. В качестве положительных контролей применялись сконструированные плазмидные ДНК с фрагментами генов М (вирус болезни Ньюкасла) и NP (вирус гриппа птиц), отрицательным контролем служила деионизированная вода. Оптимизированная программа амплификации включала этап обратной транскрипции, денатурации и 45 циклов ПЦР в реальном времени с регистрацией флуоресцентных сигналов.

Полученные результаты показали, что разработанные праймеры и зонды обеспечивают избирательное определение целевых геномных фрагментов вирусов при отсутствии перекрёстных реакций и ложноположительных сигналов. Дополнительно проведено сравнение с коммерческими наборами ПЦР-ГРИПП-А-ФАКТОР и ПЦР-НЬЮКАСЛА-ФАКТОР, результаты которого подтвердили достоверность и воспроизводимость данных, полученных с использованием разработанной системы.

Таким образом, разработанная тест-система характеризуется высокой специфичностью и может быть рекомендована для применения в ветеринарной диагностике.

В настоящем исследовании проведена оценка местной и системной переносимости компонентов вакцинной композиции в отсутствие антигенного компонента при их интраназальном и сублингвальном введении у белых беспородных лабораторных мышей. В качестве объектов исследования использовали вспомогательные компоненты вакцинной композиции маннитол и желатин в различных концентрациях, а также фосфатно-буферный раствор и инъекционную воду, применяемые в качестве технологических компонентов при разработке вакцинных кандидатов. Контрольную группу составляли интактные животные.

Переносимость оценивали в течение 10 суток по показателям клинического состояния животных, динамики массы тела и основным биохимическим параметрам крови. Установлено, что все исследованные вещества характеризовались хорошей переносимостью: клинически значимые местные и системные реакции отсутствовали, а исследуемые биохимические показатели крови не выходили за пределы референтных значений. По совокупности оцениваемых параметров оптимальными были признаны маннитол в концентрации 5 % и желатин в концентрации 0,5 %.Полученные результаты свидетельствуют о безопасности исследованных вспомогательных и технологических компонентов и подтверждают возможность их применения на доклиническом этапе разработки вакцинных композиций векторных противобруцеллезных вакцин-кандидатов на основе вируса гриппа.

В работе представлены результаты оценки микробиологического состояния чистых помещений при промышленном производстве вакцины против ящура в условиях асептического процесса. Исследования проводились в зонах классов A и B в период 2024-2025 гг. Проанализировано более 1800 проб воздуха, поверхностей оборудования и технологической одежды персонала. Микробная контаминация воздуха и производственных поверхностей не выявлена. В 1,9% проб, отобранных с одежды и перчаток персонала, обнаружены единичные микроорганизмы в пределах допустимых нормативных значений. Полученные данные свидетельствуют о стабильности асептических условий и контролируемости производственной среды.

В исследовании оценивали временную динамику гематологических показателей у коз зааненской породы в возрасте 2–3 месяцев после введения вирулентных pVapAположительных штаммов Rhodococcus equi. В период 0–65 суток в сравнении с контрольной группой анализировали показатели гемоглобина (Hb), эритроцитов (RBC), лейкоцитов (WBC), гематокрита (HCT), а также MCV, MCH, MCHC и RDW. В целом в основные временные точки между группами не было выявлено стойких статистически значимых различий. Только по показателю Hb в группе VapA-108 на 65-е сутки отмечено снижение по сравнению с контролем (p=0,033), однако малое число животных в каждой группе (n=3) требует осторожной интерпретации этого результата. Широкие 95% доверительные интервалы и высокие коэффициенты вариации свидетельствовали о выраженной индивидуальной вариабельности. Полученные данные показывают, что в модели на козах pVapA-положительные штаммы R. equi вызывали скорее слабый и вариабельный ответ, чем выраженные и стойкие системные гематологические нарушения.

Глобальный рост антибиотикорезистентности, особенно среди патогенов группы ESKAPE (Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa и Enterobacter cloacae), обусловливает необходимость разработки альтернативных антимикробных средств, к числу которых относится фаготерапия, основанная на использовании бактериофагов, способных специфически лизировать бактериальные клетки. Целью настоящего исследования являлся контроль качества экспериментальных серий препарата «Бактериофаг против патогенов ESKAPE», разработанного в ТОО «Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности» (Республика Казахстан). Объектом исследования служили три экспериментальные серии препарата (№0011224, №0021224, №0031224), для которых проведена оценка внешнего вида, извлекаемого объема, концентрации водородных ионов (pH), стерильности и специфической активности в отношении тест-культур группы ESKAPE в соответствии с требованиями СК-ESKAPE-ПР-23, Государственной фармакопеи Республики Казахстан и нормативных документов Евразийского экономического союза. Установлено, что все исследуемые серии соответствовали установленным требованиям качества, характеризовались стабильными физико-химическими показателями, подтвержденной стерильностью и высокой специфической активностью, сохранявшейся при разведениях до 10⁻⁷–10⁻¹⁰. Полученные результаты свидетельствуют о стабильности, специфичности и соответствии экспериментальных серий установленным требованиям качества, что подтверждает перспективность дальнейшего изучения и внедрения данного фагопрепарата для профилактики и терапии инфекций, вызываемых антибиотикорезистентными патогенами группы ESKAPE.