МИКОБАКТЕРИЯЛЫҚ ГЕНДЕРДІ АЛУ ҮШІН ПТР РЕАКЦИЯЛЫҚ ҚОСПАСЫНЫҢ ҚҰРАМЫН ОҢТАЙЛАНДЫРУ

Ірі қара мал туберкулезі – Mycobacterium bovis (M. bovis) бактериясынан туындайтын, ерекше клиникалық белгілері жоқ ірі қара малдың тыныс алу жолдарының жұқпалы ауруы. M. bovis түраралық тосқауылдан өтіп, көптеген басқа жабайы және үй жануарларын жұқтырып, ауру тудыруы мүмкін. Ірі қара малды вакцинациялау арқылы иммундау туберкулезге қарсы күресте стандартты профилактикалық шара болып табылады. Қазіргі уақытта адам және сиыр туберкулезіне қарсы жалғыз қол жетімді вакцина тірі әлсіретілген Кальмет-Герин бацилласы (БЦЖ) және оның модификацияланған нұсқалары болып табылады. БЦЖ вакцинасына қарағанда жоғары және тұрақты қорғанысты қамтамасыз ететін отандық вакцинаны әзірлеу қажеттілігі өзекті болып табылады. Бұл жұмыстың мақсаты M.bovis Esat-6 және TB10.4 қорғаныш ақуыздарын алу үшін ПТР реакциялық қоспасының оңтайлы құрамын таңдау болып табылады. M.bovis микобактериялық гендерін алу үшін ПТР параметрін оңтайландыру жұмыстарының нәтижесінде жалпы көлемі – 25 мкл реакциялық қоспаның құрамы: MgCl2 бар Taq ДНҚ полимеразасы – 0,3 мкл; 10x ПТР буфері – 2,5 мкл; арнайы праймерлер (20 pM), әрқайсысы 1 мкл, dNTP қоспасы (10 мМ) – 1 мкл; ДНҚ – 5 мкл анықталып, амплификацияның оңтайландырылған режимі анықталды: 94°C – 5 мин, 94°C – 1 мин, 55/62°C – 40 сек, 72°C – 1,30 мин (35 цикл), және 72°C – 7 мин, 4 °C – салқындату және шектеусіз сақтау

1. Pollock J.M., Neill S.D. Mycobacterium bovis infection and tuberculosis in cattle // Vet J. – 2002. – Р. 115-127.

2. Abbate J.M., Arfuso F., Iaria C., Arestia G., Lanteri G. Prevalence of Bovine Tuberculosis in Slaughtered Cattle in Sicily, Southern Italy // Animals (Basel). – 2020. – 1473 p.

3. Muller B., Durr S., Alonso S., Hattendorf J., Laisse C.J., Parsons S.D., van Helden P.D., Zinsstag J. Zoonotic Mycobacterium bovis-induced tuberculosis in humans // Emerg. Infect. Dis. – 2013. – Р. 899-908.

4. Hewinson R.G., Vordermeier H.M., Smith N.H., Gordon S.V. Recent advances in our knowledge of Mycobacterium bovis: a feeling for the organism // Vet Microbiol. – 2006. – Р. 127–139.

5. Domingo M., Vidal E., Marco A. Pathology of bovine tuberculosis // Res Vet Sci. – 2014. – Р. 20-29.

6. Абитаев Р.Т., Шораева К.А., Нурпейсова А.С., Сырым Н.С., Абай Ж.С., Джекебеков К.К., Сармыкова М.К., Еспембетов Б.А., Касенов М.М. Подбор и синтез праймеров для наработки генов, кодирующих протективные белки M. Bovis // Евразийское Научное Объединение. Ветеринарные науки. – 2021. – С. 159-164.