ВЛИЯНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКИХ ДОБАВОК НА РОСТОВЫЕ СВОЙСТВА СУСЛО-АГАРА ПРИ КУЛЬТИВИРОВАНИИ ПРОИЗВОДСТВЕННЫХ ШТАММОВ ДЕРМАТОФИТОВ

Дерматофиты рода Trichophyton, в первую очередь Trichophyton verrucosum, являются основными возбудителями трихофитии крупного рогатого скота. Культивирование этих микроорганизмов на твердых питательных средах сопряжено с рядом трудностей: большинство штаммов T. verrucosum обладают строгими ростовыми потребностями в витаминах, их рост часто контаминируется сопутствующей бактериальной микрофлорой, а продуктивность по биомассе и спорам на стандартных средах остается недостаточной для промышленного производства вакцин. В связи с этим актуальной задачей является оптимизация состава базовой среды сусло-агара путем введения специфических добавок, улучшающих ростовые свойства.
Цель работы – оценить влияние глицерина, инозитола, L-гистидина и хлорамфеникола на ростовые свойства сусло-агара при культивировании производственных штаммов Trichophyton verrucosum и Trichophyton mentagrophytes.
Материалы и методы. Базовой средой служил стандартный сусло-агар. В опытные образцы вводили глицерин (0,5-2,5%), инозитол (0,005-0,1%), L-гистидин (0,005-0,2 г/л) и хлорамфеникол (0,01-0,05 г/л). Ростовые свойства оценивали по линейной скорости роста, интенсивности спорообразования и продуктивности мицелия.
Результаты. Глицерин в концентрации 1,5-2,0% увеличивал линейную скорость роста T. verrucosum №123 на 28,3%, а продуктивность мицелия – на 25,6% по сравнению с контролем. Инозитол в концентрации 0,02-0,03% повышал число микроконидий с 45,2 до 73,0 млн/см³. L-гистидин в концентрации 0,02-0,04 г/л оказывал умеренное стимулирующее действие на рост T. mentagrophytes. Хлорамфеникол в концентрации 0,025 г/л полностью подавлял видимый рост бактериальной контаминирующей микрофлоры без угнетения дерматофитов. Комплексное использование добавок повышало суммарный выход микроконидий на 53,4% по сравнению со стандартным сусло-агаром.
Заключение. Введение в состав сусло-агара глицерина (1,5-2,0% для T. Verrucosum и 2,0-2,5% для T. mentagrophytes), инозитола (0,02-0,03%), L-гистидина (0,02-0,04 г/л) и хлорамфеникола (0,025 г/л) позволяет существенно улучшить ростовые свойства питательной среды, повышая продуктивность производственных культур дерматофитов и обеспечивая надежную защиту от бактериальной контаминации.

1. СТО 9384-168-89767728-2015. Стандарт организации. Вакцина ТВМ. – ООО Фирма «БиоХимФарм», г. Радужный, 2018. – 24 с.

2. Зайцева В.В., Красочно И.А. Влияние состава плотной питательной среды на продуктивность дерматофитов // Экология и животный мир. – 2015. – № 1. – С. 53–59.

3. Зайцева В.В., Красочно И.А. Оптимизация выращивания дерматофитов на питательных средах разного состава // Ученые записки Витебской государственной академии ветеринарной медицины. – 2017. – Т. 53, № 2. – С. 78–82.

4. Robbins W.J., Mackinnon J.E., Ma R. Vitamin requirements of dermatophytes // Bulletin of the Torrey Botanical Club. – 1945. – Vol. 72. – P. 509–523. – DOI: 10.2307/2481615.

5. Balabanoff V.A., Strashilova M. Comparative physiological studies on saprophytic and pathogenic dermatophytes. II. Growth factors // Mykosen. – 1970. – Vol. 13, No. 10. – P. 499–504. – DOI: 10.1111/j.1439-0507.1970.tb00654.x.

6. Philpot C.M. The use of nutritional tests for the differentiation of dermatophytes // Sabouraudia. – 1977. – Vol. 15, No. 2. – P. 141–150. – DOI: 10.1080/00362177785190221.

7. Robbins W.J., Ma R. A growth factor for Trichophyton verrucosum // American Journal of Botany. – 1945. – Vol. 32. – P. 509.

8. Arendrup M.C., Guinea J., Meletiadis J., Jorgensen K.M. EUCAST susceptibility testing of Trichophyton rubrum: chloramphenicol and cycloheximide supplemented growth medium improve assay performance // Meeting Abstract. – 2018.

9. Патент РФ № 2275631. Способ диагностики дерматомикозов и питательная среда для дерматофитов. – 2006.

10. Алешкевич В.Н., Медведев А.П., Кулешов Д.Б. Стимуляция роста и размножения дерматофитов // Ветеринарный журнал Беларуси. – 2018. – № 1. – С. 41–45.

11. Зайцева В.В., Красочно И.А. Влияние компонентов микроорганизмов на продуктивность дерматофитов на сусло-агаре // Вестник Витебского государственного университета. – 2014. – № 8. – С. 45–51.

12. Aly R. Culture media for growing dermatophytes // Journal of the American Academy of Dermatology. – 1994. – Vol. 31, No. 3. – P. S107–S108. – DOI: 10.1016/S0190-9622(94)70277-0.