МИКРОНОСИТЕЛИ В СУСПЕНЗИОННОЙ КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК VERO: ПОДХОД К ЭФФЕКТИВНОЙ РЕПЛИКАЦИИ И МАСШТАБИРОВАНИЮ ЧМЖЖ (ШТАММ NIGERIA 75/1)

В настоящем исследовании оценивалась репродукция штамма Nigeria 75/1 вируса чумы мелких жвачных животных (ЧМЖЖ) в культуре клеток Vero, культивируемых в суспензионных условиях с использованием микроносителей (МН). Данный подход представляет собой современную платформу, сочетающую преимущества суспензионного культивирования с высокой удельной продуктивностью клеток, обеспечиваемой адгезией на поверхности МН.  

Было исследовано влияние различных параметров – типа МН (Cytodex 1 и Cytodex 3), посевной концентрации клеток Vero, инфицирующей дозы вируса и длительности культивирования на продуктивность системы. Экспериментальные результаты показали, что использование МН обеспечивает надежную адгезию и активную пролиферацию клеток Vero, создавая оптимальные условия для репликации вируса. Полученный вирусный титр (≥ 6,75 lg ТЦД50/см³) превышал показатели, описанные при традиционном монослойном культивировании, что свидетельствует о повышенной эффективности репродукции вируса. Таким образом, полученные данные подтверждают высокую перспективность технологии культивирования с применением МН как в экспериментальных исследованиях, так и для промышленной разработки и производства вакцин против ЧМЖЖ. 

1. Kumar N and al. Peste des petits ruminants virus infection of small ruminants; A Comprehensive ReviewA threat to small ruminants // Viruses 2014, 6(6), 2287-2327; https://doi.org/10.3390/v6062287

2. Banyard A.C., Parida S., Batten C., Oura C. et al. Global distribution of peste des petits ruminants virus and prospects for improved diagnosis and control // Journal of General Virology (2010), 91, P.2885–2897. https://doi.org/10.1099/vir.0.025841-0

3. FAO/OIE. Global Strategy for the Control and Eradication of PPR. 2015. (Available online: https://openknowledge.fao.org/items/3a081556-4053-499c-856b-b087dce7e604) [Дата обращения 15.08.2025]

4. Hodgson SMoffat K, Hill HFlannery JT, Graham SPBaron MD, Darpel KE.2018.Comparison of the Immunogenicities and Cross-Lineage Efficacies of Live Attenuated Peste des Petits Ruminants Virus Vaccines PPRV/Nigeria/75/1 and PPRV/Sungri/96. J Virol92:10.1128/jvi.01471-18. https://doi.org/10.1128/jvi.01471-18

5. Sen A., Saravanan P., Balamurugan V., Rajak K.K., Sudhakar S.B., Bhanuprakash V., Parida S., Singh R.K. Vaccines against peste des petits ruminants virus // Expert Review of Vaccines. 2010. Vol. 9. P. 785-796. https://doi.org/10.1586/erv.10.74

6. Sousa M. et al. Process intensification for Peste des Petites Ruminants Virus vaccine production// Vaccine. 2019. Vol. 37, № 47. P. 7041–7051. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2019.07.009

7. Silva A.C. et al. Scalable culture systems using different cell lines for the production of Peste des Petits ruminants vaccine // Vaccine. 2008 Vol. 26, № 26. P. 3305–3311. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2008.03.077

8. Van Wezel A. Growth of Cell-strains and Primary Cells on Micro-carriers in Homogeneous Culture // Nature. 1967. Vol. 216. P. 64-65. https://doi.org/10.1038/216064a0

9. GE Healthcare. Microcarrier Cell Culture: Principles and Methods. 2005. (Available online: https://ru.scribd.com/document/364986081/Microcarrier-Cell-Culture-Principles-and-Methods) [Дата обращения 15.08.2025]

10. Souza, M.C., Freire, M.S., Castilho, L.R. (2007). Cultivation of Vero Cells on Microporous and Macroporous Microcarriers. In: Smith, R. (eds) Cell Technology for Cell Products., vol 3. Springer, Dordrecht. https://doi.org/10.1007/978-1-4020-5476-1_136

11. Kehoe D., Jing D., Lock L., Tzanakakis E. Scalable stirred-suspension bioreactor culture of human pluripotent stem cells // Tissue Engineering Part A. 2010. Vol.16. – P. 405-421. https://doi.org/10.1089/ten. tea.2009.0454

12. Forestell S., Kalogerakis N., Behie L., Gerson D. Development of the optimal inoculation conditions for microcarrier cultures // Biotechnology and Bioengineering. 2002. Vol.39. – P. 305-313. https://doi.org/10.1002/bit.260390308

13. Caron M., Emans P., Coolsen M., Voss L., Surtel D., Cremers A., van Rhijn L. Welting Redifferentiation of dedifferentiated human articular chondrocytes: comparison of 2D and 3D cultures // Osteoarthritis and Cartilage. 2012. Vol. 20. P. 1170-1178. https://doi.org/10.1016/j.joca.2012.06.016

14. Derakhti S., Safiabadi-Tali S.H., Amoabediny G., Sheikhpour M. Attachment and detachment strategies in microcarrier-based cell culture technology: A comprehensive review // Materials Science and Engineering C. 2019. Vol. 103. P. 109782. https://doi.org/10.1016/j.msec.2019.109782.

15. Reed L.J., Muench H., A simple method of estimating fifty per cent endpoints // American Journal of Epidemiology. 1938. Vol.27, Issue 3, P. 493–497, https://doi.org/10.1093/oxfordjournals.aje.a118408

16. Dou Y., Liang Z., Prajapati M., Zhang R., Li Y., Zhang Z. Expanding diversity of susceptible hosts in Peste Des Petits Ruminants virus infection and its potential mechanism beyond // Frontiers in Veterinary Sciences. 2020. Vol. 7. https://doi.org/10.3389/fvets.2020.00066

17. Diallo A, Taylor WP, Lefèvre PC, Provost A. Atténuation d'une souche de virus de la peste des petits ruminants: candidat pour un vaccin homologue vivant [Attenuation of a strain of rinderpest virus: potential homologous live vaccine]. Rev Elev Med Vet Pays Trop. 1989;42(3):311-319.

18. Bora M., Yousuf R.W., Dhar P., Singh R.P. An overview of process intensification and thermo stabilization for upscaling of Peste des petits ruminants vaccines in view of global control and eradication // Virus disease. 2018. Vol. 29. P. 285–296. https://doi.org/10.1007/s13337-018-0455-3

19. Sarkar J., Sreenivasa B.P., Singh R.P., Dhar P., Bandyopadhyay S.K. Comparative efficacy of various chemical stabilizers on the thermostability of a live-attenuated peste des petits ruminants (PPR) vaccine // Vaccine. 2003. Vol. 21. P. 4728–4735. https://doi.org/10.1016/S0264-410X(03)00512-7

20. Diallo A., Minet C., Le Goff C., Berhe G., Albina E., Libeau G., Barrett T. The threat of peste des petits ruminants: Progress in vaccine development for disease control // Vaccine. 2007. Vol. 25. P. 5591–5597. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2007.02.013

21. Mahapatra M., Selvaraj M., Parida S. Comparison of Immunogenicity and Protective Efficacy of PPR Live Attenuated Vaccines (Nigeria 75/1 and Sungri 96) Administered by Intranasal and Subcutaneous Routes // Vaccines. 2020. Vol. 8. P. 168. https://doi.org/10.3390/vaccines8020168

22. Cosseddu G.M., Polci A., Pinoni C., Capobianco Dondona A., Iapaolo F., Orsini G., Izzo F., Bortone G., Ronchi F.G., Di Ventura M., et al. Evaluation of Humoral Response and Protective Efficacy of an Inactivated Vaccine Against Peste des Petits Ruminants Virus in Goats // Transboundary and Emerging Diseases. 2016. Vol. 63. P. 447–452. https://doi.org/10.1111/tbed.12314

23. Panagopoulos A., Sideri K. From lab to mass production: a policy for enabling the licensing of mRNA vaccines // Frontiers in Public Health. 2023. Vol. 11. P. 1151713. https://doi.org/10.3389/fpubh.2023.1151713

24. Gallo-Ramirez L.E. et al. Production of viral vaccines in suspension cultures of Vero cells using microcarriers: Advances and challenges // Applied Microbiology and Biotechnology. 2015. Vol. 99. P. 2125–2136.

25. Barrett P.N. et al. Vero cell platform in vaccine production: Moving toward cell culture–based viral vaccines // Expert Review of Vaccines. 2009. Vol. 8, № (5). P. 607–618. https://doi.org/10.1586/erv.09.19