Освежение вирулентного штамма вируса болезни Ньюкасла в куриных эмбрионах и проверка его патогенных свойств на цыплятах

Поддержание штаммов в рабочем состоянии, сохранение их ценных свойств являются важными условиями практически любой работы с микроорганизмами – от первичного изучения до использования их в производстве различных биопрепаратов. В связи с этим в данной статье представлены результаты исследования по освежению штамма возбудителя одного из таких инфекционных заболеваний, как вирулентный вирус болезни Ньюкасла (ВБН) в развивающиеся куриных эмбрионах (РКЭ) и определение его патогенной активности на цыплятах.
За 9 лет хранения биологическая активность штамма «Т-53» ВБН снизилась до 1,74 lg ЭИД50/мл. В результате проведенных трех последовательных пассажей в РКЭ биологическая активность штамма повысилась до приемлемого уровня, который позволяет длительному хранению. Затем наработанная вируссодержащая суспензия (ВСС) лиофилизирована с добавлением защитной среды согласно паспортным данным штамма. Качество лиофильно высушеного штамма оценено по следующим основным показателям, таким как: внешний вид, наличие посторонней примеси, плесени и трещин ампул, наличие вакуума, растворимость, концентрации водородных ионов, массовая доля влаги, стерильность в отношении бактериальных, грибковых и микоплазменных контаминантов, биологическая активность и патогенность.
Проверка показала соответствие физико-химических и биологических свойств освеженного образца штамма «Т-53» ВБН с данными, заложенными в паспорте штамма.

1. OIE, Office of International Epizootics, Manual of Diagnostic tests and vaccines for terrestrial animals. Newcastle disease // Truszczynski Eds. OIE standard commission publication, 2004 version, part 2, section 2.1 chapter 2.1.15.

2. Hines N. L., Miller C. L. Avian Paramixovirus serotype-1: review of disease distribution,clinica symptoms and laboratory diagnostics // Veterinary medicine international volume .-2012.- 17 p. doi:101155/2012/708216

3. Ganar K., Das M., Sinha S., Kumaret S. Newcastle disease virus: Current status and our understanding // Virus Research, 2014. – (184). – Р. 71-81

4. Liu X.F, Wan H.Q, Wu Y.T. Pathotypical and genotypical characterization of strains of Newcastle disease virus isolated from outbreaks in chicken and goose flocks in some regions of China during -1985–2001.//Arch Virol -2003.-148. – P. 1387-1403

5. Susta L., Miller P.J., Afonso C.L., Estevez C., Yu Q., Zhang J., Brown C.C. Pathogenicity evaluation of different Newcastle disease virus chimeras in 4-week-old chickens // Trop. Anim. Health Prod. – 2010. 42:1785–1795

6. Collins P.L., Hightower L.E., Ball L.A. Transcriptional map for Newcastle disease virus // J. Virol.- 1980. 35:682–693

7. Seal B.S., King D.J., Sellers H.S. The avian response to Newcastle disease virus // Dev. Comp. Immunol. - 2000. 24:257–268

8. Alexander D.J. Newcastle disease and other avian paramyxoviruses // Rev Sci Tech., 2000 Aug;19(2):443-62. doi: 10.20506/rst.19.2.1231. PMID: 10935273.

9. Alexander D.J. Newcastle disease and other avian Paramyxoviridae infections. In Diseases of poultry, 10th Ed. / B.W. Calnek with H.J. Barnes, C.W. Beard, L.R. McDougald & Y.M. Saif, eds // Mosby-Wolfe, London, 1997. - Р. 541-570.

10. Болезнь Ньюкасла 2024 Merck & Co., Inc., Рахвей, Нью-Джерси, США, и ее подразделения [Электрон.ресурс]. - URL: https://www.msd-animal-health-poultry.ru/disease/boleznnyukasl/

11. Коровин Р.Н., Зеленский В.П., Грошева Г.А. Лабораторная диагностики болезней птиц // Москва «Агропромиздат». – 1989. – С. 17.

12. Reed, I.J. A simple method of estimating fifty per cent endpoints [Text] / I.J. Reed // Am. J. Hyd., 1938. – Vol.27. – P. 493-497.

13. Средства лекарственные биологические для ветеринарного применения. ГОСТ 28085- 2013.

14. Методические указания по определению уровня антител к вирусу ньюкаслской болезни в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) // Болезни птиц. – 1997. – № 13. – С. 448-453.

15. Шмыленко В.А., Бондаренко А.П. Методические подходы к решению проблемы сохранения прихотливых микроорганизмов // Дальневосточный Журнал Инфекционной Патологии, 2018. — №34

16. Токарик Э.Ф., Ковальская Л.А., Скотникова Т.А. и др. Методические подходы к конструированию защитных сред для живых вирусных вакцин // Научные основы производства ветеринар ных препаратов. – М., 1989. – С. 17-21.

17. Токарик Э.Ф., Ковальская Л.А., Константинов В.М. Методы статистического анализа в исследованиях по стабилизации вирусных вакцин. Достижения и перспективы развития криобиологии и криомедицины // Тезисы докл. Межд. конф. Харьков, 1988. – С. 56.

18. Глущенко А. В. Биологические свойства вирусов болезни Ньюкасла, выделенных из природных резервуаров среди диких птиц в различных регионах России в 2008-2018 гг./ Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук // А. В. Глущенко. – Владимир, 2022. – С. 87

19. Виткова О.Н. Сравнительное изучение чувствительности и специфичности иммуноферментного анализа с хемилюминисцентной и колориметрической детекцией для выявления антигенов и антител к вирусам гриппа птиц и болезни Ньюкасла. / О.Н. Виткова, О.В. Капустина, Т.П. Лобова и др. // Вопросы вирусологии, 2015. – 60 (6). – С.41-45.

20. Капустина О.В. Разработка и совершенствование средств и методов контроля особо опасных инфекций, вызываемых вирусами порядка Мononegavirales / Диссертация на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук // О.В. Капустина. – Вольгинский, 2016. – С. 104-143.

21. Кенжебаева М.К., Матраимов М.Б., Мамбеталиев М. Получение термостабильного варианта вируса Ньюкаслской болезни и изучение его иммунобиологических свойств / Наука, новые технологии и инновации Кыргызстана, Бишкек, 2016. - №3. – С.74-77.

22. Битов Н.Т., Мамадалиев С.М., Далбаев Н.К., Кыдырбаев Ж.К. Троицкий Е.Н. Изучение возможности получения и применения пылевидной вакцины против болезни Ньюкасла / НИСХИ., пгт. Гвардейский, 1998. - Биотехнология. Теория и практика. №1-2 (5-6) с. 31-33

23. Мұзарап Д.И., Табыс Ш.Т., Сәрсенқұлова Н.А., Кенжебаева М.К., Мамбеталиев М., Наханов А.К., Жугунисов К.Д., Эрганиш О. Освежение вирулентного штамма вируса парагриппа-3 крупного рогатого скота в культуре клеток и проверка патогенных свойств на целевых животных // Микробиология және вирусология, 2023. - №3 (42). - www.imv-journal.kz