МОДИФИКАЦИЯ МЕТОДИКИ РЕАКЦИИ НАРАСТАНИЯ ТИТРА ФАГА ДЛЯ АЭРОМОНАДНЫХ БАКТЕРИОФАГОВ

В статье представлены результаты исследований по модификации методики реакции нарастания титра фага для аэромонадных бактериофагов. Применяя бактериофаги Аv-4 серии УлГАУ и Аh-4 серии УлГАУ, которые характеризуются высокими титрами литической активности и широким спектром специфического литического действия, были отработаны оптимальных параметры постановки реакции нарастания титра фага (количественный показатель реакции, имеющий диагностическое значение, и оптимальное время, обеспечивающее полноценное взаимодействие фага с бактериями). бактериями).Эмпирически установлено, что наиболее эффективными для постановки РНФ с целью индикации бактерий A. veronii bv.veronii и A.hydrophila в объектах санитарного надзора являются следующие параметры: концентрация индикаторной культуры, обнаруживаемая при постановке реакции – 103 - 104 м.к./мл/г, рабочее разведение бактериофага - 105 БОЕ/мл. Эксперименты по оптимизации методики постановки РНФ показали, что для обнаружения бактерий A. hydrophila и A. veronii bv. veronii в нестерильных пробах воды и рыбы в лабораторных условиях наиболее оптимальным является предварительное подращивание исследуемого материала в течение 2 ч при (29±1) 0С с последующим заражением фагами Аv-4 серии УлГАУ и Аh-4 серии УлГАУ и инкубированием смеси в течение 4 ч при (29±1) 0С. Исследование выполнено согласно тематическому плану-заданию Министерства сельского хозяйства Российской Федерации, регистрационный номер ЕГИСУ НИОКТР 123031600041-9.

1. Isolation, characterization, and application of a bacteriophage infecting the fish pathogen Aeromonas hydrophila / M. Akmal, A. Rahimi-Midani, M. Hafeez-ur-Rehman, A. Hussain, T.-J. Choi // Pathogens. – 2020. – Vol. 9. – P. 215.

2. Isolation of a lytic bacteriophage against virulent Aeromonas hydrophila from an organized equine farm /T. Anand, R.K. Vaid, B. Bera, J. Singh, S. Barua, N. Virmani // J. Basic Microbiol. – 2022. – Vol. 56. – P. 432–437.

3. Genomic structure of the Aeromonas bacteriophage pAh6-C and its comparative genomic analysis / J.W. Jun, H.J. Kim, S.K. Yun, J.Y. Chai, S.C. Park // Arch Virol. – 2015. - № 160(2). – Р. 561-564.

4. Методика постановки реакции нарастания титра фага Bacillus anthracis / Н.А. Феоктистова, Д.А. Васильев, Е.И. Климушкин // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. – 2015. - № 4 (32). – С. 99-105.

5. Биоиндикация содержания бактерий Bacillus coagulans в пищевых продуктах / Е.И. Климушкин, Н.А. Феоктистова, Д.А. Васильев // Экология родного края: проблемы и пути их решения. Материалы Всероссийской научно-практической конференции с международным участием - Ульяновск, 2014. - С. 377-379.

6. Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology. Order XII. Aeromonadales ord. nov. / А. Martin-Carnahan, S.W. Joseph / In: Brenner D.J., Krieg N.R., Staley J.T., Garrity G.M., editors. - Williams & Wilkins; Philadelphia, PA, USA: 2005. - P. 556–578.

7. Биосенсорная детекция бактерий рода Bacillus в молоке и молочных продуктах для предупреждения их порчи / Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин, Н.А. Феоктистова, А.В. Алешкин // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. - 2013. - № 4 (24). - С. 36-43.

8. Бактериофаги рода Bacillus и перспективы их применения / Н.А. Феоктистова, Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин, А.В. Алешкин // Инфекция и иммунитет. - 2014. - Т. 4. - № S. - С. 116-117.

9. Куклина, Н.Г. Бактериофаговый препарат для индикации и идентификации Aeromonas salmonicida: дис. ... кандидата биологических наук: 06.02.02 /Куклина Наталья Григорьевна. - Уфа, 2017. - 128 с.

10. Насибуллин, И.Р. Индикация и идентификация Aeromonas hydrophila с использованием биопрепарата на основе специфического бактериофага: дис. ... кандидата биологических наук : 06.02.02 / / Насибуллин Ильдар Равильевич. – Саратов, 2020. – 176 с.