ЖАСУША ӨСІНДІЛЕРІНІҢ МИКОПЛАЗМАЛЫҚ ЛАСТАНУЫН АНЫҚТАУ ӘДІСТЕРІН ЖӘНЕ МИКОПЛАЗМАҒА ҚАРСЫ ПРЕПАРАТТАРДЫҢ ТИІМДІЛІГІН

Бұл мақалада антимикоплазмалық препараттардың тиімділігін бағалау бойынша зерттеу нәтижелері келтірілген. Микоплазмаларды анықтау үшін жасуша өсінділерін ДНҚ флюорохроммен (DAPI, Apollo Scientific) бояу әдістері, PlasmoTest™ (Invivogen, France), MycoStrip (Invivogen, France) және тәжірибеде кеңінен ұсынылған EZ-PCR™ (Biological Industries, Israel) әдістерін қолданылды. Нәтижелерге сүйене отырып, микоплазмаға қарсы препараттар MycoZap (Lonza Bioscience), Plasmocin (Invivogen, France), MRA (BIO-RAD) и ВМ-Cyclin (Roche) микоплазмалық ластанумен күресуде тиімді екендігі анықталды. ДНҚ флюорохромдарымен анықтау әдісі микоплазманың болуын анықтауы субъективті болуы мүмкін, өйткені оның микоплазмаға сезімталдығы төмен. Өз кезегінде, MycoStrip жиынтығы осы жиынтықтың анықталатын түрлерінің тізіміне кірмейтін микоплазмалардың болуына байланысты жалған теріс нәтиже бере алады. PlasmoTest™ оң және теріс нәтижелері EZ-PCR™ нәтижелерімен дәл сәйкес келді. Егер микоплазмалық ластануға күдік болса, алдын-ала талдау үшін ДНҚ-ны бояу әдісі мен MycoStrip жиынтығын, ал PlasmoTest™ және EZ-PCR түпкілікті растау үшін қолдануға болады.

1. Degeling MH, Maguire CA, Bovenberg MS, Tannous BA. Sensitive assay for mycoplasma detection in mammalian cell culture. Anal Chem. 2012; 84(9):4227–4232. doi: 10.1021/ac2033112. [PMC free article] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

2. Dvorakova H, Valicek L, Reichelova M. Detection of mycoplasma contamination in cell cultures and bovine sera. J Vet Med. 2005;50(6):262–268. doi: 10.17221/5622-VETMED. [CrossRef] [Google Scholar]

3. Dobrovolny PL, Bess D. Optimized PCR-based detection of mycoplasma. J Vis Exp. 2011(52). [PMC free article] [PubMed]

4. Uphoff CC, Drexler HG. Comparative PCR analysis for detection of mycoplasma infections in continuous cell lines. In Vitro Cell Dev Biol. 2002; 38(2):79–85. doi: 10.1290/1071-2690(2002)038<0079:CPAFDO>2.0.CO;2. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

5. Uphoff CC, Drexler HG. Detecting mycoplasma contamination in cell cultures by polymerase chain reaction. Methods Mol Med. 2004; 88:319–326. [PubMed] [Google Scholar]

6. Drexler HG, Uphoff CC. Contamination of cell cultures Mycoplasma. The Encyclopedia of Cell Technology. New York: Wiley; 2000. – P. 609-27

7. Freshney RI. Culture of Animal Cells. 6th edition. Hoboken, NJ, USA: John Wiley & Sons; 2010. [Google Scholar]

8. Uphoff CC, Drexler HG. Mycoplasma contamination of cell cultures. In: Flickinger MC, editor. Encyclopedia of Industrial Biotechnology: Bioprocess, Bioseparation, and Cell Technology. New York, NY, USA: John Wiley & Sons; 2010. pp. 3611–3630. [Google Scholar]

9. Drexler HG, Uphoff CC. Mycoplasma contamination of cell cultures: incidence, sources, effects, detection, elimination, prevention. Cytotechnology. 2002; 39(2):75–90. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

10. СОП-GMP-НИИПББ-ПР-265-2020. ПЦР анализ по входному контролю культуры клеток на наличие микоплазмы с помощью набора EZ-PCR™ Mycoplasma Detection Kit.

11. Исмагамбетова Д.Ж., Наханов А.К., Жаппарова Г.А. Оценка влияния фармазина на элиминацию микоплазм в культурах клеток // Инновационные развитие науки в обеспечении биологической безопасности. – Гвардейский, 2014. – 109 с.

12. Ligasová, A., Vydržalová, M., Buriánová, R., Brůčková, L., Večeřová, R., Janošťáková, A., & Koberna, K. (2019). A New Sensitive Method for the Detection of Mycoplasmas Using Fluorescence Microscopy. Cells, 8(12), 1510. https://doi.org/10.3390/cells8121510

13. Young, L., Sung, J., Stacey, G. et al. Detection of Mycoplasma in cell cultures. Nat Protoc 5, 929–934 (2010). https://doi.org/10.1038/nprot.2010.43

14. https://www.invivogen.com/sites/default/files/pictures/japanese-cell%20bank-study-mycoplasma-detection-methods.pdf

15. RMSTRONG, S.E., MARIANO, J.A. and LUNDIN, D.J., 2010. The scope of mycoplasma contamination within the biopharmaceutical industry. Biologicals, vol. 38, no. 2, pp. 211-213. http://dx.doi.org/10.1016/j.biologicals.2010.03.002.