biobБиобезопасность и БиотехнологияBiosafety and Biotechnology2707-72412957-5702Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности10.58318/2957-5702-2022-12-56-66biob-39Research ArticleБИОЛОГИЧЕСКАЯ БЕЗОПАСНОСТЬ И БИОЗАЩИТАBIOLOGICAL SAFETY AND BIOSECURITYОЦЕНКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕРИЛЬНОСТИ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВMicrobiological control of water quality for the production of biological pМолдагуловаС. У.MoldagulovaS. U.sabina_moldagulova@mail.ruКалимолдаЭ. Ж.KalimoldaE. Zh.СадикалиеваС. О.SadikaliyevaS. O.ТоккаринаГ. Б.TokkarinaG. B.ВоронинаЕ. П.VoroninaE. P.ЕспембетовБ. А.EspembetovB. A.НурпейсоваА. С.NurpeisovaА. S.КасеновМ. М.KasenovМ. М.ШораеваК. А.ShorayevaK. A.Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасностиКазахстанScientific Research Institute of Biological Safety ProblemsKazakhstan2022260120231125666Copyright © Молдагулова С.У., Калимолда Э.Ж., Садикалиева С.О., Токкарина Г.Б., Воронина Е.П., Еспембетов Б.А., Нурпейсова А.С., Касенов М.М., Шораева К.А., 20232023Молдагулова С.У., Калимолда Э.Ж., Садикалиева С.О., Токкарина Г.Б., Воронина Е.П., Еспембетов Б.А., Нурпейсова А.С., Касенов М.М., Шораева К.А.Moldagulova S.U., Kalimolda E.Z., Sadikaliyeva S.O., Tokkarina G.B., Voronina E.P., Espembetov B.A., Nurpeisova А.S., Kasenov М.М., Shorayeva K.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.biosafety.kz/jour/article/view/39

одним из основных критериев биологической безопасности иммунобиологических препаратов является их стерильность. В данной статье представлены результаты оценки двух методов – прямого посева и мембранной фильтрации. А также представлены результаты контроля стерильности инактивированной вакцины против Covid-19 «QazCovid-in®», серии № 0400721, № 0410721, № 0420721. Оценка стерильности испытуемых образцов трех серий вакцины показала, что после инкубации питательная среда оставалась чистой как в образцах прямого посева, так и образцах мембранной фильтрации. Учет и оценка полученных данных исследований проведены в соответствии с Государственной Фармакопеей Республики Казахстан. Для оценки чувствительности двух методов определения стерильности, образцы иммунобиологических препаратов были экспериментально заражены культурами тест-штаммов Staphylococcus aureus, Candida albicans и Clostridium sporogenes. В результате определения стерильности на двух методах, мембранной фильтрации и прямого посева, образцы показали одинаковую чувствительность, при обнаружении дрожжей и анаэробных организмов во всех исследуемых концентрациях тест-штаммов (10, 1, 0,1 КОЕ/мл). А для обнаружения аэробных микроорганизмов метод мембранной фильтрации оказался более чувствительным по сравнению с методом прямого посева, доказательством являются положительные результаты во всех пробах тест-штаммов при мембранной фильтрации (3/3 во всех концентрациях) и отрицательные при постановке метода прямого посева (в концентрациях 1 и 0,1 КОЕ/мл). Таким образом, цель настоящего исследования заключалась в оценке этих двух методов, используемых для определения стерильности иммунобиологических препаратов.

one of the main criteria for the biological safety of immunobiological preparations is their sterility. This article presents the results of the evaluation of two methods of direct seeding and membrane filtration. The results of sterility control of the inactivated vaccine against Covid-19 «QazCovid-in®, series № 0400721, № 0410721, № 0420721 are also presented. Evaluation of the sterility of the tested samples of the three vaccine series showed that after incubation, the nutrient medium remained clean both in direct seeding samples and membrane filtration samples, as well as accounting and evaluation of the obtained research data in accordance with the State Pharmacopoeia of the Republic of Kazakhstan. To assess the sensitivity of two methods for determining sterility, samples of immunobiological preparations were experimentally infected with cultures of test strains of St. aureus, C. albicans and C. sporogenes. As a result, the methods of membrane filtration and direct seeding showed the same sensitivity when detecting yeast and anaerobic organisms in all studied concentrations of test strains (10, 1, 0.1 CFU/ml). And for the detection of aerobic microorganisms, the membrane filtration method turned out to be more sensitive compared to the direct seeding method, which is proved by positive results in all samples of test strains with membrane filtration (3/3 in all concentrations) and negative results when setting the direct seeding method (in concentrations of 1 and 0.1 CFU/ml). Thus, the purpose of this study was to evaluate these two methods used to determine the sterility of immunobiological preparations using two methods: direct seeding and membrane filtration

иммунобиологический препаратстерильностьметод прямого посеваметод мембранной фильтрацииконтаминацияimmunobiological preparationsterilitydirect seeding methodmembrane filtration methodcontaminationReferencesСуханова С.М., Бердникова З.Е., Захарова Н.Е., Меркулов В.А. Испытание на стерильность иммунобиологических лекарственных препаратов в России. История вопроса и современные требования // Профилактика, диагностика, лечение. – 2018. – Вып. 18 (часть 1). – С.5-15. http:// doi:10.30895/2221-996Х-2018-18-1-5-15Суханова С.М., Бердникова З.Е., Захарова Н.Е., Меркулов В.А. Испытание на стерильность иммунобиологических лекарственных препаратов в России. История вопроса и современные требования // Профилактика, диагностика, лечение. – 2018. – Вып. 18 (часть 1). – С.5-15. http:// doi:10.30895/2221-996Х-2018-18-1-5-15Государственная Фармакопеи Республики Казахстан. I изданной в 2008 г. – С.165-172.Государственная Фармакопеи Республики Казахстан. I изданной в 2008 г. – С.165-172.Микробиологический контроль стерильности лекарственных средств [Электрон. ресурс]. URL: http://www.gmpua.com/QC/SterilitytestingМикробиологический контроль стерильности лекарственных средств [Электрон. ресурс]. URL: http://www.gmpua.com/QC/SterilitytestingEdward C.T., James P.A., Radha T. Sterility Assurance-Current and Future State // J. Pharm. Sci. Technol. – 2022. – Vol. 76:3. – P. 263-277. http://doi:10.5731/pdajpst.2020.012526Edward C.T., James P.A., Radha T. Sterility Assurance-Current and Future State // J. Pharm. Sci. Technol. – 2022. – Vol. 76:3. – P. 263-277. http://doi:10.5731/pdajpst.2020.012526Производство стерильных лекарственных средств. Приложение №1 к Правилам надлежащей производственной практики (GMP) Евразийского экономического союза [Электрон. ресурс]. https://pharmacopoeia.ru/pravila-nadlezhashhej-proizvodstvennoj-praktiki-evrazijskogoekonomicheskogo-soyuzaПроизводство стерильных лекарственных средств. Приложение №1 к Правилам надлежащей производственной практики (GMP) Евразийского экономического союза [Электрон. ресурс]. https://pharmacopoeia.ru/pravila-nadlezhashhej-proizvodstvennoj-praktiki-evrazijskogoekonomicheskogo-soyuzaWinkler D., Lukaszewicz V. Long-term analysis of sterility testing of immunobiological preparations // J. Hyg. Epidemiol. Microbiol. Immunol. –1989. –Vol. 33:3. –P.317-322.Winkler D., Lukaszewicz V. Long-term analysis of sterility testing of immunobiological preparations // J. Hyg. Epidemiol. Microbiol. Immunol. –1989. –Vol. 33:3. –P.317-322.Parveen S., Kaur S., Wilson S.A., Kenney J.L., William M.M., Gupta R.K. Evaluation of growth based rapid microbiological methods for sterility testing of vaccines and other biological products // Vaccine. – 2011. – Vol.29:45. – P.2012-23. http://doi:10.1016/j.vaccine.2011.08.055Parveen S., Kaur S., Wilson S.A., Kenney J.L., William M.M., Gupta R.K. Evaluation of growth based rapid microbiological methods for sterility testing of vaccines and other biological products // Vaccine. – 2011. – Vol.29:45. – P.2012-23. http://doi:10.1016/j.vaccine.2011.08.055England M.R., Stock F., Gebo J.E., Frank K.M., Lau A.F. Comprehensive Evaluation of Compendial USP <71>, BacT/Alert Dual-T, and Bactec FX for Detection of Product Sterility Testing Contaminants // J.Clin.Microbiol. – 2019. –Vol. 57:2. – P.1548-18. http://doi:10.1128/JCM.01548-18England M.R., Stock F., Gebo J.E., Frank K.M., Lau A.F. Comprehensive Evaluation of Compendial USP <71>, BacT/Alert Dual-T, and Bactec FX for Detection of Product Sterility Testing Contaminants // J.Clin.Microbiol. – 2019. –Vol. 57:2. – P.1548-18. http://doi:10.1128/JCM.01548-18Shiota T. Microbiology // J.Am. Dent. Assoc. –1956. – Vol. 52:4. – P. 409-11. http://doi:10.14219/jada.archive.1956.007Shiota T. Microbiology // J.Am. Dent. Assoc. –1956. – Vol. 52:4. – P. 409-11. http://doi:10.14219/jada.archive.1956.007Moyes R.B., Reynolds J., Breakwell D.P. Differential staining of bacteria: gram stain // J.Curr. Protoc.Microbiol. – 2009. –Vol. 3:3. – 3 p. http://doi:10.1002/9780471729259.mca03cs15Moyes R.B., Reynolds J., Breakwell D.P. Differential staining of bacteria: gram stain // J.Curr. Protoc.Microbiol. – 2009. –Vol. 3:3. – 3 p. http://doi:10.1002/9780471729259.mca03cs15Sanders E.R. Aseptic laboratory techniques: plating methods // J. Vis. Exp. – 2012. – Vol. 11:63. –P. 3064. http://doi:10.3791/3064Sanders E.R. Aseptic laboratory techniques: plating methods // J. Vis. Exp. – 2012. – Vol. 11:63. –P. 3064. http://doi:10.3791/3064Cortés A., Sandino C., Arias J. Validación de la prueba de esterilidad para vacunas virales en vehículos oleoso y acuoso // Revista de la facultad de farmacia. – 2003. – Vol. 45:1. – P.55-59.Cortés A., Sandino C., Arias J. Validación de la prueba de esterilidad para vacunas virales en vehículos oleoso y acuoso // Revista de la facultad de farmacia. – 2003. – Vol. 45:1. – P.55-59.Mukherjee S., Sukdev M., Mahto R., Basu D., Javed R., Goel G., Bhattacharya S., Basu S., Chandy M. Importance and results of sterility testing of various products in a microbiology laboratory of eastern India // J. Me. Microbiol. – 2022. –Vol. 40:1. – P. 138-140. http://doi:10.1016/j.ijmmb.2021.10.008Mukherjee S., Sukdev M., Mahto R., Basu D., Javed R., Goel G., Bhattacharya S., Basu S., Chandy M. Importance and results of sterility testing of various products in a microbiology laboratory of eastern India // J. Me. Microbiol. – 2022. –Vol. 40:1. – P. 138-140. http://doi:10.1016/j.ijmmb.2021.10.008Woedtke T., Крамер А. Limits of sterility guarantee // GMS Krankenhhyg Interdiszip. – 2008. – Vol. 3:3. – 19 p.Woedtke T., Крамер А. Limits of sterility guarantee // GMS Krankenhhyg Interdiszip. – 2008. – Vol. 3:3. – 19 p.Seema P., Simleen K., Selwyn A., James L., William M., Rajesh K. Evaluation of growth based rapid microbiological methods for sterility testing of vaccines and other biological products // J.Vac. – 2011. – Vol. 29:45. – P. 8012-8023. 055 http://doi:10.14219/jada.archive.1956.0070Seema P., Simleen K., Selwyn A., James L., William M., Rajesh K. Evaluation of growth based rapid microbiological methods for sterility testing of vaccines and other biological products // J.Vac. – 2011. – Vol. 29:45. – P. 8012-8023. 055 http://doi:10.14219/jada.archive.1956.0070

The authors declare that there are no conflicts of interest present.