biobБиобезопасность и БиотехнологияBiosafety and Biotechnology2707-72412957-5702Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности10.58318/2957-5702-2025-22-12-19biob-177Research ArticleСТАТЬИArticlesОсвежение вирулентного штамма вируса болезни Ньюкасла в куриных эмбрионах и проверка его патогенных свойств на цыплятахRefreshment of a virulentic strain of Newcastle disease virus in chicken embryos and testing its pathogenic properties on chickenshttps://orcid.org/0000-0001-9203-2189КилибаевС. С.KilibaevS. S.

пгт Гвардейский 

Gvardeysky 

s.kilibayev@biosafety.kzhttps://orcid.org/0000-0001-6666-6532КенжебаеваМ. К.KenzhebaevaM. K.

пгт Гвардейский 

Gvardeysky 

https://orcid.org/0000-0001-6034-6642МамбеталиевМ.MambetalievM.

пгт Гвардейский 

Gvardeysky 

https://orcid.org/0000-0002-5807-7604АзанбековаМ. А.AzanbekovaM. A.

пгт Гвардейский 

Gvardeysky 

https://orcid.org/0009-0008-9853-142XВалиеваА. Д.ValievaA. D.

пгт Гвардейский 

Gvardeysky 

https://orcid.org/0000-0001-9930-0297СарсенкуловаН. А.SarsenkulovaN. A.

пгт Гвардейский 

Gvardeysky 

https://orcid.org/0000-0001-6565-082XТуыскановаМ. С.TuyskanovaM. S.

пгт Гвардейский 

Gvardeysky 

https://orcid.org/0000-0002-5363-3501МузарапД. И.MuzarapD. I.

пгт Гвардейский 

Gvardeysky 

https://orcid.org/0000-0002-4909-6598ТабысШ. Т.TabysSh. T.

пгт Гвардейский 

Gvardeysky 

https://orcid.org/0009-0001-3209-2312КадыроваБ. Б.KadyrovaB. B.

пгт Гвардейский 

Gvardeysky 

https://orcid.org/0009-0007-5302-1648АшимоваА. А.AshimovaA. A.

пгт Гвардейский 

Gvardeysky 

https://orcid.org/0000-0003-4238-5116ЖугунисовК. Д.ZhugunisovK. D.

пгт Гвардейский 

Gvardeysky 

ТОО «Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности»Казахстан«Scientific Research Institute of Biological Safety Problems» LLPKazakhstan2025170720251221219Copyright © Килибаев С.С., Кенжебаева М.К., Мамбеталиев М., Азанбекова М.А., Валиева А.Д., Сарсенкулова Н.А., Туысканова М.С., Музарап Д.И., Табыс Ш.Т., Кадырова Б.Б., Ашимова А.А., Жугунисов К.Д., 20252025Килибаев С.С., Кенжебаева М.К., Мамбеталиев М., Азанбекова М.А., Валиева А.Д., Сарсенкулова Н.А., Туысканова М.С., Музарап Д.И., Табыс Ш.Т., Кадырова Б.Б., Ашимова А.А., Жугунисов К.Д.Kilibaev S.S., Kenzhebaeva M.K., Mambetaliev M., Azanbekova M.A., Valieva A.D., Sarsenkulova N.A., Tuyskanova M.S., Muzarap D.I., Tabys S.T., Kadyrova B.B., Ashimova A.A., Zhugunisov K.D.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.biosafety.kz/jour/article/view/177

Поддержание штаммов в рабочем состоянии, сохранение их ценных свойств являются важными условиями практически любой работы с микроорганизмами – от первичного изучения до использования их в производстве различных биопрепаратов. В связи с этим в данной статье представлены результаты исследования по освежению штамма возбудителя одного из таких инфекционных заболеваний, как вирулентный вирус болезни Ньюкасла (ВБН) в развивающиеся куриных эмбрионах (РКЭ) и определение его патогенной активности на цыплятах.За 9 лет хранения биологическая активность штамма «Т-53» ВБН снизилась до 1,74 lg ЭИД50/мл. В результате проведенных трех последовательных пассажей в РКЭ биологическая активность штамма повысилась до приемлемого уровня, который позволяет длительному хранению. Затем наработанная вируссодержащая суспензия (ВСС) лиофилизирована с добавлением защитной среды согласно паспортным данным штамма. Качество лиофильно высушеного штамма оценено по следующим основным показателям, таким как: внешний вид, наличие посторонней примеси, плесени и трещин ампул, наличие вакуума, растворимость, концентрации водородных ионов, массовая доля влаги, стерильность в отношении бактериальных, грибковых и микоплазменных контаминантов, биологическая активность и патогенность.Проверка показала соответствие физико-химических и биологических свойств освеженного образца штамма «Т-53» ВБН с данными, заложенными в паспорте штамма.

The preservation of strain viability and maintenance of their valuable properties are critical prerequisites for all stages of microorganism research, ranging from initial characterization to their application in the production of various biopreparations. This study investigates the revitalization of the virulent Newcastle disease virus (NDV) strain "T-53" in developing chicken embryos (DCE) and evaluates its pathogenic activity in chicks.After nine years of storage, the biological activity of the "T-53" NDV strain declined to 1.74 lg EID50/ml. Following three successive passages in DCE, the biological activity of the strain was restored to a level suitable for long-term storage. The virus-containing suspension produced was subsequently lyophilized with the addition of a protective medium in accordance with the strain's passport specifications. The quality of the lyophilized strain was evaluated using several key parameters, including appearance, absence of foreign impurities, mold, and ampoule cracks, presence of vacuum, solubility, pH value, moisture content, sterility against bacterial, fungal, and mycoplasmal contaminants, biological activity, and pathogenicity.The findings confirmed that the physicochemical and biological properties of the revitalized "T- 53" NDV strain correspond to the specifications outlined in its passport, ensuring its suitability for further use and long-term preservation.

вирусштаммболезнь Ньюкаслапатогенностьосвежениезащитная средалиофилизацияvirusstrainNewcastle diseasepathogenicityrefreshmentprotective environmentlyophilizationReferencesOIE, Office of International Epizootics, Manual of Diagnostic tests and vaccines for terrestrial animals. Newcastle disease // Truszczynski Eds. OIE standard commission publication, 2004 version, part 2, section 2.1 chapter 2.1.15.OIE, Office of International Epizootics, Manual of Diagnostic tests and vaccines for terrestrial animals. Newcastle disease // Truszczynski Eds. OIE standard commission publication, 2004 version, part 2, section 2.1 chapter 2.1.15.Hines N. L., Miller C. L. Avian Paramixovirus serotype-1: review of disease distribution,clinica symptoms and laboratory diagnostics // Veterinary medicine international volume .-2012.- 17 p. doi:101155/2012/708216Hines N. L., Miller C. L. Avian Paramixovirus serotype-1: review of disease distribution,clinica symptoms and laboratory diagnostics // Veterinary medicine international volume .-2012.- 17 p. doi:101155/2012/708216Ganar K., Das M., Sinha S., Kumaret S. Newcastle disease virus: Current status and our understanding // Virus Research, 2014. – (184). – Р. 71-81Ganar K., Das M., Sinha S., Kumaret S. Newcastle disease virus: Current status and our understanding // Virus Research, 2014. – (184). – Р. 71-81Liu X.F, Wan H.Q, Wu Y.T. Pathotypical and genotypical characterization of strains of Newcastle disease virus isolated from outbreaks in chicken and goose flocks in some regions of China during -1985–2001.//Arch Virol -2003.-148. – P. 1387-1403Liu X.F, Wan H.Q, Wu Y.T. Pathotypical and genotypical characterization of strains of Newcastle disease virus isolated from outbreaks in chicken and goose flocks in some regions of China during -1985–2001.//Arch Virol -2003.-148. – P. 1387-1403Susta L., Miller P.J., Afonso C.L., Estevez C., Yu Q., Zhang J., Brown C.C. Pathogenicity evaluation of different Newcastle disease virus chimeras in 4-week-old chickens // Trop. Anim. Health Prod. – 2010. 42:1785–1795Susta L., Miller P.J., Afonso C.L., Estevez C., Yu Q., Zhang J., Brown C.C. Pathogenicity evaluation of different Newcastle disease virus chimeras in 4-week-old chickens // Trop. Anim. Health Prod. – 2010. 42:1785–1795Collins P.L., Hightower L.E., Ball L.A. Transcriptional map for Newcastle disease virus // J. Virol.- 1980. 35:682–693Collins P.L., Hightower L.E., Ball L.A. Transcriptional map for Newcastle disease virus // J. Virol.- 1980. 35:682–693Seal B.S., King D.J., Sellers H.S. The avian response to Newcastle disease virus // Dev. Comp. Immunol. - 2000. 24:257–268Seal B.S., King D.J., Sellers H.S. The avian response to Newcastle disease virus // Dev. Comp. Immunol. - 2000. 24:257–268Alexander D.J. Newcastle disease and other avian paramyxoviruses // Rev Sci Tech., 2000 Aug;19(2):443-62. doi: 10.20506/rst.19.2.1231. PMID: 10935273.Alexander D.J. Newcastle disease and other avian paramyxoviruses // Rev Sci Tech., 2000 Aug;19(2):443-62. doi: 10.20506/rst.19.2.1231. PMID: 10935273.Alexander D.J. Newcastle disease and other avian Paramyxoviridae infections. In Diseases of poultry, 10th Ed. / B.W. Calnek with H.J. Barnes, C.W. Beard, L.R. McDougald & Y.M. Saif, eds // Mosby-Wolfe, London, 1997. - Р. 541-570.Alexander D.J. Newcastle disease and other avian Paramyxoviridae infections. In Diseases of poultry, 10th Ed. / B.W. Calnek with H.J. Barnes, C.W. Beard, L.R. McDougald & Y.M. Saif, eds // Mosby-Wolfe, London, 1997. - Р. 541-570.Болезнь Ньюкасла 2024 Merck & Co., Inc., Рахвей, Нью-Джерси, США, и ее подразделения [Электрон.ресурс]. - URL: https://www.msd-animal-health-poultry.ru/disease/boleznnyukasl/Bolezn' N'yukasla 2024 Merck & Co., Inc., Rakhvey, N'yu-Dzhersi, SSHA, i yeye podrazdeleniya [Электрон.ресурс]. - URL: https://www.msd-animal-health-poultry.ru/disease/boleznnyukasl/Коровин Р.Н., Зеленский В.П., Грошева Г.А. Лабораторная диагностики болезней птиц // Москва «Агропромиздат». – 1989. – С. 17.Korovin R.N., Zelenskiy V.P., Grosheva G.A. Laboratornaya diagnostiki bolezney ptits // Moskva «Agropromizdat». – 1989. – S. 17.Reed, I.J. A simple method of estimating fifty per cent endpoints [Text] / I.J. Reed // Am. J. Hyd., 1938. – Vol.27. – P. 493-497.Reed, I.J. A simple method of estimating fifty per cent endpoints [Text] / I.J. Reed // Am. J. Hyd., 1938. – Vol.27. – P. 493-497.Средства лекарственные биологические для ветеринарного применения. ГОСТ 28085- 2013.Sredstva lekarstvennyye biologicheskiye dlya veterinarnogo primeneniya. GOST 28085-2013.Методические указания по определению уровня антител к вирусу ньюкаслской болезни в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) // Болезни птиц. – 1997. – № 13. – С. 448-453.Metodicheskiye ukazaniya po opredeleniyu urovnya antitel k virusu n'yukaslskoy bolezni v reaktsii tormozheniya gemagglyutinatsii (RTGA) // Bolezni ptits. – 1997. – № 13. – S. 448-453.Шмыленко В.А., Бондаренко А.П. Методические подходы к решению проблемы сохранения прихотливых микроорганизмов // Дальневосточный Журнал Инфекционной Патологии, 2018. — №34Shmylenko V.A., Bondarenko A.P. Metodicheskiye podkhody k resheniyu problemy sokhraneniya prikhotlivykh mikroorganizmov // Dal'nevostochnyy Zhurnal Infektsionnoy Patologii, 2018. — №34Токарик Э.Ф., Ковальская Л.А., Скотникова Т.А. и др. Методические подходы к конструированию защитных сред для живых вирусных вакцин // Научные основы производства ветеринар ных препаратов. – М., 1989. – С. 17-21.Tokarik E.F., Koval'skaya L.A., Skotnikova T.A. i dr. Metodicheskiye podkhody k konstruirovaniyu zashchitnykh sred dlya zhivykh virusnykh vaktsin // Nauchnyye osnovy proizvodstva veterinar nykh preparatov. – M., 1989. – S. 17-21.Токарик Э.Ф., Ковальская Л.А., Константинов В.М. Методы статистического анализа в исследованиях по стабилизации вирусных вакцин. Достижения и перспективы развития криобиологии и криомедицины // Тезисы докл. Межд. конф. Харьков, 1988. – С. 56.Tokarik E.F., Koval'skaya L.A., Konstantinov V.M. Metody statisticheskogo analiza v issledovaniyakh po stabilizatsii virusnykh vaktsin. Dostizheniya i perspektivy razvitiya kriobiologii i kriomeditsiny // Tezisy dokl. Mezhd. konf. Khar'kov, 1988. – S. 56.Глущенко А. В. Биологические свойства вирусов болезни Ньюкасла, выделенных из природных резервуаров среди диких птиц в различных регионах России в 2008-2018 гг./ Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук // А. В. Глущенко. – Владимир, 2022. – С. 87Glushchenko A. V. Biologicheskiye svoystva virusov bolezni N'yukasla, vydelennykh iz prirodnykh rezervuarov sredi dikikh ptits v razlichnykh regionakh Rossii v 2008-2018 gg./ Dissertatsiya na soiskaniye uchenoy stepeni kandidata biologicheskikh nauk // A. V. Glushchenko. – Vladimir, 2022. – S. 87Виткова О.Н. Сравнительное изучение чувствительности и специфичности иммуноферментного анализа с хемилюминисцентной и колориметрической детекцией для выявления антигенов и антител к вирусам гриппа птиц и болезни Ньюкасла. / О.Н. Виткова, О.В. Капустина, Т.П. Лобова и др. // Вопросы вирусологии, 2015. – 60 (6). – С.41-45.Vitkova O.N. Sravnitel'noye izucheniye chuvstvitel'nosti i spetsifichnosti immunofermentnogo analiza s khemilyuministsentnoy i kolorimetricheskoy detektsiyey dlya vyyav-leniya antigenov i antitel k virusam grippa ptits i bolezni N'yukasla. / O.N. Vitkova, O.V. Kapustina, T.P. Lobova i dr. // Voprosy virusologii, 2015. – 60 (6). – S.41-45.Капустина О.В. Разработка и совершенствование средств и методов контроля особо опасных инфекций, вызываемых вирусами порядка Мononegavirales / Диссертация на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук // О.В. Капустина. – Вольгинский, 2016. – С. 104-143.Kapustina O.V. Razrabotka i sovershenstvovaniye sredstv i metodov kontrolya osobo opasnykh infektsiy, vyzyvayemykh virusami poryadka Mononegavirales / Dissertatsiya na soiskaniye uchenoy stepeni doktora veterinarnykh nauk // O.V. Kapustina. – Vol'ginskiy, 2016. – S. 104-143.Кенжебаева М.К., Матраимов М.Б., Мамбеталиев М. Получение термостабильного варианта вируса Ньюкаслской болезни и изучение его иммунобиологических свойств / Наука, новые технологии и инновации Кыргызстана, Бишкек, 2016. - №3. – С.74-77.Kenzhebayeva M.K., Matraimov M.B., Mambetaliyev M. Polucheniye termostabil'nogo varianta virusa N'yukaslskoy bolezni i izucheniye yego immunobiologicheskikh svoystv / Nauka, novyye tekhnologii i innovatsii Kyrgyzstana, Bishkek, 2016. - №3. – S.74-77.Битов Н.Т., Мамадалиев С.М., Далбаев Н.К., Кыдырбаев Ж.К. Троицкий Е.Н. Изучение возможности получения и применения пылевидной вакцины против болезни Ньюкасла / НИСХИ., пгт. Гвардейский, 1998. - Биотехнология. Теория и практика. №1-2 (5-6) с. 31-33Bitov N.T., Mamadaliyev S.M., Dalbayev N.K., Kydyrbayev ZH.K. Troitskiy Ye.N. Izucheniye vozmozhnosti polucheniya i primeneniya pylevidnoy vaktsiny protiv bolezni N'yukasla / NISKHI., pgt. Gvardeyskiy, 1998. - Biotekhnologiya. Teoriya i praktika. №1-2 (5-6) s. 31-33Мұзарап Д.И., Табыс Ш.Т., Сәрсенқұлова Н.А., Кенжебаева М.К., Мамбеталиев М., Наханов А.К., Жугунисов К.Д., Эрганиш О. Освежение вирулентного штамма вируса парагриппа-3 крупного рогатого скота в культуре клеток и проверка патогенных свойств на целевых животных // Микробиология және вирусология, 2023. - №3 (42). - www.imv-journal.kzMūzarap D.I., Tabys SH.T., Sәrsenkˌūlova N.A., Kenzhebayeva M.K., Mambetaliyev M., Nakhanov A.K., Zhugunisov K.D., Erganish O. Osvezheniye virulentnogo shtamma virusa paragrippa-3 krupnogo rogatogo skota v kul'ture kletok i proverka patogennykh svoystv na tselevykh zhivotnykh // Mikrobiologiya zhәne virusologiya, 2023. - №3 (42). - www.imv-journal.kz

The authors declare that there are no conflicts of interest present.