biobБиобезопасность и БиотехнологияBiosafety and Biotechnology2707-72412957-5702Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности10.58318/2957-5702-2024-19-96-108biob-149Research ArticleСТАТЬИArticlesМОДИФИКАЦИЯ МЕТОДИКИ РЕАКЦИИ НАРАСТАНИЯ ТИТРА ФАГА ДЛЯ АЭРОМОНАДНЫХ БАКТЕРИОФАГОВMODIFICATION OF THE PHAGE TITER INCREASE REACTION PROCEDURE FOR AEROMONAD BACTERIOPHAGEShttps://orcid.org/0000-0002-4329-450XФеоктистоваН.FeoktistovaN.

Феоктистова Наталья, кандидат биологических наук, доцент кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы

feokna@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9214-7816ЛомакинА.LomakinA.artemy.lomakin@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9214-7816МинаеваА.MinaevaA.lina.minaeva.11@mail.ruРаксинаИ.RaxinaI.rid-ugsha@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9214-7816МайоровПMaiorovP.pavelmayorovv@yandex.ruФГБОУ ВО Ульяновский государственный аграрный университет имени П.А. СтолыпинаРоссияUlyanovsk State Agrarian University named after P.A. StolypinRussian Federation20241610202301996108Copyright © Феоктистова Н., Ломакин А., Минаева А., Раксина И., Майоров П., 20232023Феоктистова Н., Ломакин А., Минаева А., Раксина И., Майоров П.Feoktistova N., Lomakin A., Minaeva A., Raxina I., Maiorov P.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.biosafety.kz/jour/article/view/149

В статье представлены результаты исследований по модификации методики реакции нарастания титра фага для аэромонадных бактериофагов. Применяя бактериофаги Аv-4 серии УлГАУ и Аh-4 серии УлГАУ, которые характеризуются высокими титрами литической активности и широким спектром специфического литического действия, были отработаны оптимальных параметры постановки реакции нарастания титра фага (количественный показатель реакции, имеющий диагностическое значение, и оптимальное время, обеспечивающее полноценное взаимодействие фага с бактериями). бактериями).Эмпирически установлено, что наиболее эффективными для постановки РНФ с целью индикации бактерий A. veronii bv.veronii и A.hydrophila в объектах санитарного надзора являются следующие параметры: концентрация индикаторной культуры, обнаруживаемая при постановке реакции – 103 - 104 м.к./мл/г, рабочее разведение бактериофага - 105 БОЕ/мл. Эксперименты по оптимизации методики постановки РНФ показали, что для обнаружения бактерий A. hydrophila и A. veronii bv. veronii в нестерильных пробах воды и рыбы в лабораторных условиях наиболее оптимальным является предварительное подращивание исследуемого материала в течение 2 ч при (29±1) 0С с последующим заражением фагами Аv-4 серии УлГАУ и Аh-4 серии УлГАУ и инкубированием смеси в течение 4 ч при (29±1) 0С. Исследование выполнено согласно тематическому плану-заданию Министерства сельского хозяйства Российской Федерации, регистрационный номер ЕГИСУ НИОКТР 123031600041-9.

The article presents the results of studies on modification of the phage titer increase reaction technique for aeromonad bacteriophages. Using bacteriophages Av-4 of the UlSAU series and Ah-4 of the Ul-SAU series, which are characterized by high titers of lytic activity and a wide spectrum of specific lyt-ic action, the optimal parameters for setting up the phage titer increase reaction (a quantitative indicator of the reaction that has diagnostic value and the optimal time that ensures full interaction of the phage with bacteria) were developed. It was empirically established that the following parameters are the most effective for setting up the RNF for the purpose of indicating A. veronii bv.veronii and A.hydrophila bacteria in sanitary inspection facilities: the concentration of the indicator culture de-tected during the reaction is 103 - 104 m.c./ml/g, the working dilution of the bacteriophage is 105 PFU/ml. Experiments to optimize the methodology for setting up the RNF have shown that the most optimal method for detecting A. hydrophila and A. veronii bv. veronii bacteria in non-sterile water and fish samples in laboratory conditions is preliminary cultivation of the test material for 2 hours at (29±1) 0C, followed by infection with phages Av-4 of the UlSAU series and Ah-4 of the UlSAU series and incubation of the mixture for 4 hours at (29±1) 0C. The study was carried out in accordance with the thematic plan-task of the Ministry of Agriculture of the Russian Federation, registration number EGISU NIOKTR 123031600041-9.

бактериофагиAeromonas veronii bv.veroniiAeromonas hydrophilaреакция нарастания титра фагамодификацияметодикаbacteriophagesAeromonas veronii bv.veroniiAeromonas hydrophilaphage t ter increase reactionmodificationmethodologyИсследование выполнено согласно тематическому плану-заданию Министерства сельского хозяйства Российской Федерации, регистрационный номер ЕГИСУ НИОКТР 123031600041-9.ReferencesIsolation, characterization, and application of a bacteriophage infecting the fish pathogen Aeromonas hydrophila / M. Akmal, A. Rahimi-Midani, M. Hafeez-ur-Rehman, A. Hussain, T.-J. Choi // Pathogens. – 2020. – Vol. 9. – P. 215.Akmal M., Rahimi-Midani A., Hafeez-ur-Rehman M., Hussain A., Choi T.-J. (2020) Isolation, characterization, and application of a bacteriophage infecting the fish pathogen Aeromonas hydrophila. Pathogens, vol. 9, p. 215.Isolation of a lytic bacteriophage against virulent Aeromonas hydrophila from an organized equine farm /T. Anand, R.K. Vaid, B. Bera, J. Singh, S. Barua, N. Virmani // J. Basic Microbiol. – 2022. – Vol. 56. – P. 432–437.Anand T., Vaid R.K., Bera B., Singh J., Barua S., Virmani N. (2022) Isolation of a lytic bacteriophage against virulent Aeromonas hydrophila from an organized equine farm. J. Basic Microbiol, vol. 56, pp. 432–437.Genomic structure of the Aeromonas bacteriophage pAh6-C and its comparative genomic analysis / J.W. Jun, H.J. Kim, S.K. Yun, J.Y. Chai, S.C. Park // Arch Virol. – 2015. - № 160(2). – Р. 561-564.Jun J.W., Kim H.J., Yun S.K., Chai J.Y., Park S.C. (2015) Genomic structure of the Aeromonas bacteriophage pAh6-C and its comparative genomic analysis. Arch Virol, vol. 160(2), pp. 561-564.Методика постановки реакции нарастания титра фага Bacillus anthracis / Н.А. Феоктистова, Д.А. Васильев, Е.И. Климушкин // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. – 2015. - № 4 (32). – С. 99-105.Feoktistova N.A., Vasiliev D.A., Klimushkin E.I. (2015) Methodology for setting up the reaction of increasing the titer of the Bacillus anthracis phage / N.A. Feoktistova, D.A. Vasiliev, E.I. Klimushkin // Vestnik of Ulyanovsk state agricultural academy, vol. 4 (32), pp. 99-105.Биоиндикация содержания бактерий Bacillus coagulans в пищевых продуктах / Е.И. Климушкин, Н.А. Феоктистова, Д.А. Васильев // Экология родного края: проблемы и пути их решения. Материалы Всероссийской научно-практической конференции с международным участием - Ульяновск, 2014. - С. 377-379.Klimushkin E.I., Feoktistova N.A., Vasiliev D.A. (2014) Bioindication of the content of Bacillus coagulans bacteria in food products. Ecology of the native land: problems and solutions. Proceedings of the All-Russian scientific and practical conference with international participation, Ulyanovsk, 2014, pp. 377-379.Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology. Order XII. Aeromonadales ord. nov. / А. Martin-Carnahan, S.W. Joseph / In: Brenner D.J., Krieg N.R., Staley J.T., Garrity G.M., editors. - Williams & Wilkins; Philadelphia, PA, USA: 2005. - P. 556–578.Martin-Carnahan А., Joseph S.W. (2005) Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology. Order XII. Aeromonadales ord. nov, Williams & Wilkins; Philadelphia, PA, USA, pp. 556–578.Биосенсорная детекция бактерий рода Bacillus в молоке и молочных продуктах для предупреждения их порчи / Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин, Н.А. Феоктистова, А.В. Алешкин // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. - 2013. - № 4 (24). - С. 36-43.Vasiliev D. A., Zolotukhin S. N., Feoktistova N. A., Aleshkin A. V. (2013) Biosensor detection of Bacillus bacteria in milk and dairy products to prevent spoilage. Vestnik of Ulyanovsk state agricultural academy, vol. 4 (24), pp. 36-43.Бактериофаги рода Bacillus и перспективы их применения / Н.А. Феоктистова, Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин, А.В. Алешкин // Инфекция и иммунитет. - 2014. - Т. 4. - № S. - С. 116-117.Vasiliev D. A., Zolotukhin S. N., Feoktistova N. A., Aleshkin A. V. (2014) Bacteriophages of the genus Bacillus and prospects for their application. Infection and immunity, vol. 4 (S), pp. 116-117.Куклина, Н.Г. Бактериофаговый препарат для индикации и идентификации Aeromonas salmonicida: дис. ... кандидата биологических наук: 06.02.02 /Куклина Наталья Григорьевна. - Уфа, 2017. - 128 с.Kuklina N. G. (2017) Bacteriophage preparation for indication and identification of Aeromonas salmonicida: diss. ... Candidate of Biological Sciences: 06.02.02 Kuklina Natalya Grigorievna, Ufa, 128 p.Насибуллин, И.Р. Индикация и идентификация Aeromonas hydrophila с использованием биопрепарата на основе специфического бактериофага: дис. ... кандидата биологических наук : 06.02.02 / / Насибуллин Ильдар Равильевич. – Саратов, 2020. – 176 с.Nasibullin I.R. (2020) Indication and identification of Aeromonas hydrophila using a biological product based on a specific bacteriophage: dis. ... Candidate of Biological Sciences: 06.02.02 Nasibullin Ildar Ravilievich, Saratov, 176 p.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.